¿El tipo de hisopo utilizado hace diferencia para la detección de Mycoplasma hyopneumoniae por PCR?

Mycoplasma hyopneumoniae es uno de los patógenos más importantes que afectan el tracto respiratorio de los cerdos. Esta bacteria causa neumonía enzoótica, una condición crónica que es clínicamente evidente en crecimiento y terminación, a pesar de que los cerdos en todas las fases de la producción pueden ser colonizados con M. hyopneumoniae.

A nivel granja, la neumonía enzoótica se caracteriza por una tos seca y retraso del crecimiento, posteriormente, a nivel de industria, estas infecciones llevan a pérdidas económicas significativas, especialmente debido a las co-infecciones respiratorias con otros patógenos bacterianos y virales, la disminución del rendimiento, y aumento de los costos asociados con el control de la enfermedad.

El diagnóstico de infecciones M. hyopneumoniae se puede intentar con el uso de varios métodos. Por ejemplo, el aislamiento bacteriano, la identificación de una respuesta serológica contra el agente y la detección de material genético de la bacteria. Sin embargo, la bacteria es extremadamente difícil de cultivar en condiciones de laboratorio, requiere un medio especializado y crece muy lentamente, y por esas razones, la creciente M. hyopneumoniae in vitro generalmente no se considera una opción para fines de diagnósticos simples.

La detección de anticuerpos, aunque muy común, trae varias limitaciones para la interpretación. Ensayos ELISA actuales utilizados para detectar anticuerpos M. hyopneumoniae no pueden diferenciar la respuesta debido a la exposición natural a partir de la respuesta debida a la vacunación. Además, el momento de la seroconversión después de la exposición puede ser inusualmente largo.
Por otro lado, la detección del material genético por PCR de M. hyopneumoniae exhibe un cambio rápido y de alta precisión. Por otra parte, las infecciones por M. hyopneumoniae pueden ser detectadas en animales vivos incluso semanas antes de la aparición de los signos clínicos y antes del desarrollo de anticuerpos específicos.
La detección por PCR de Mycoplasma hyopneumoniae puede proporcionar información sobre la dinámica de infección y se puede realizar usando muestras recogidas de diferentes sitios del cuerpo a lo largo del tracto respiratorio del cerdo, incluyendo cavidades nasales, amígdalas, laringe, tráquea, y bronquios, entre otros. Y más comúnmente, hisopos estériles se utilizan para recoger estas muestras.

Varios tipos de hisopos se pueden utilizar para recoger muestras clínicas de cerdos. Los hisopos con punta de rayón han sido ampliamente utilizados y descritos en la literatura para detectar M. hyopneumoniae. Sin embargo, los hisopos de nylon flocados parecen ser utilizados mínimamente para la detección de este patógeno, por lo tanto su rendimiento para detectar M. hyopneumoniae es desconocido.
Los hisopos con punta de rayón consisten en un pequeño taco de rayón envuelta alrededor del extremo de una barra (Figura 1).
Los hisopos de nylon flocado están hechos de fibras de nylon cortas como un cepillo (Figura 1).

Varios estudios han demostrado una alta sensibilidad de diagnóstico para células epiteliales respiratorias o de detección de patógenos respiratorios en los seres humanos, tales como virus de la influenza, virus sincitial respiratorio y adenovirus. Por lo tanto, se puede especular que los hisopos de nylon flocados podrían aumentar la detección de M. hyopneumoniae por PCR en tiempo real.

Figura 1. Diferencias entre hisopos.

Diferencias-entre-hisopos-con-punta-de-rayon-y-nylon-flocado-para-deteccion-de-mycoplasma-hyopneumoniae-en-cerdos-Razas-Porcinas

Arriba con punta de rayón. Debajo nylon flocado.

En un estudio realizado en el Laboratorio de Investigación de Mycoplasma en la Universidad de Minnesota, hemos probado la absorción de PBS y el lubricante (utilizado como un sustituto de las secreciones respiratorias) usando hisopos de nylon flocado y punta de rayón. Además, se realizó una comparación de la detección de M. hyopneumoniae por PCR en tiempo real utilizando los mismos tipos de hisopos. Se realizó un análisis estadístico para comparar los valores de absorción y capas entre ambos hisopos.

No se observaron diferencias en el porcentaje de muestras positivas detectadas por cada tipo de hisopo. Sin embargo, la absorción de PBS y lubricante, y de detección de carga M. hyopneumoniae fueron significativamente mayor (p <0,05) en nylon flocado que en hisopos de rayón, a pesar de las diferencias de medias de capas fueron sólo 1,1 (Tabla 1).

Los resultados de este estudio sugieren que los hisopos de nylon flocado son una buena alternativa para la detección de M. hyopneumoniae cuando los costos son comparables. Por otra parte, hisopos de nylon flocado se podrían utilizar para mejorar la detección de M. hyopneumoniae cuando la carga bacteriana es inferior, tal como en las infecciones crónicas. En general, nuestros resultados sugieren que el material del dispositivo que se utiliza para la recogida de muestras puede influir significativamente en la detección de M. hyopneumoniae por PCR.

Tabla 1. Valor medio capas (y diferencia) para la detección de Mycoplasma hyopneumoniae por PCR en tiempo real por tipo de hisopo.

Valor medio de capas
Hisopos con punta de rayón26.15a
Hisopos con nylon flocado27.25b
Diferencia en capas1.1

Diferentes letras minúsculas denotan diferencias estadísticamente significativas entre los dos tipos (p <0,05).

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Fuente: Razas Porcinas.


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